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BioMed 常用的發(fā)色底物 
法國(guó)HYPHEN BioMed公司(簡稱HBM)--歐洲知名血液産品生産商,通過(guò)國(guó)際ISO9001和ISO13485雙項認證,生産的大部分産品均通過(guò)歐洲CE認證,爲臨床診斷提供了可靠的保證.
法國(guó)HYPHEN BioMed公司是一家生産血栓止血,凝血纖溶和自身免疫的診斷試劑廠家。其産品包括:血凝試劑,發(fā)色底物,ELISA試劑盒,人和動物的純化酶及純化蛋白,單克隆和多克隆抗體.應用手工或者自動化的方法,爲您的實驗室診斷、免疫學(xué)研究,提供一系列完整的成(chéng)套試劑,并廣泛應用于生物技術和醫産業。
發(fā)色底物法檢測原理: 
首先人工合成(chéng)可以被(bèi)待測凝血活酶催化裂解的化合物,且化合物連接上産色物質,在檢測過(guò)程中産色物質可被(bèi)解離下來,使被(bèi)檢樣(yàng)品中出現顔色變化,根據顔色變化可推算出被(bèi)檢凝血活酶的活性。産色物質一般選用連接對(duì)硝基胺(PNA)。遊離的PNA呈黃色,其測定波長(cháng)選用405nm。在這(zhè)一波長(cháng)下,其它物質對(duì)光的吸收小于PNA對(duì)光吸收的1%。具體檢測方法即可采用動态法、也可采用終點法。動态法即是連續記錄樣(yàng)品的吸光度變化,算出單位時(shí)間吸光度的變化量,并以每分鍾吸光度的變化來報告結果。終點法即是指在活性酶同産色物質作用一段時(shí)間後(hòu),加入乙酸終止反應,檢測此段時(shí)間内吸光度的變化,進(jìn)而推算出待檢酶的活性。凝血儀上多數采用動态法,因爲它比終點法簡單、結果更爲準确。其優點主要表現在:
用酶學(xué)方法直接定量、測定結果準确、重複性好(hǎo)、便于自動化和标準化、所需樣(yàng)品量小。
凝血儀使用産色物質在檢測血栓/止血指标時(shí)大緻可分成(chéng)三種(zhǒng)模式。
①對(duì)酶的檢測:
即在含酶的樣(yàng)品中直接加入産色物質,因爲酶可裂解産色物質釋放PNA,監測由于PNA釋放而導緻被(bèi)檢樣(yàng)品在405nm處光吸收的變化,就(jiù)可推算樣(yàng)品中酶的活性。如對(duì)凝血酶、纖溶酶等的檢測。
②對(duì)酶原的檢測:
要對(duì)某種(zhǒng)酶原進(jìn)行測定,必須先用激活劑將(jiāng)其激活,使其活化位點暴露,才可將(jiāng)産色物質上的PNA裂解下來。加入的激活劑必須過(guò)量,因爲隻有這(zhè)樣(yàng)才能(néng)使酶原被(bèi)全部激活,酶原的量才會(huì)同樣(yàng)品中酶的活性成(chéng)一定的數量關系。樣(yàng)品中酶的活性可通過(guò)PNA釋放,即樣(yàng)品吸光度的變化反應出來,由此則可推算出樣(yàng)品中酶原的含量。
③對(duì)酶抑制物的檢測:
首先往待檢樣(yàng)品中加入過(guò)量對(duì)應的酶中和該抑制物,剩餘的酶可裂解産色物質釋放PNA,監測由于PNA釋放而導緻光吸收的變化,就(jiù)可測出酶的活性,進(jìn)而可推算出樣(yàng)品中抑制物的含量。如對(duì)抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)等。